FishOverviewFluorescent ibridazione in situ è stato inizialmente sviluppato alla fine degli anni 1980 da procedure di ibridazione radioattive utilizzate per i geni umani mappatura. Alla fine, questa tecnologia è stata utilizzata per la per la caratterizzazione di riarrangiamenti cromosomici e cromosomi marcatori, il rilevamento di microdelezioni, e la diagnosi pre-natale di aneuploidie comuni nei laboratori di citogenetica clinica. Oggi, numerose sonde di DNA sono stati commercializzati, promuovere ulteriormente le applicazioni cliniche a livello di diffusione della cytogenetics.With molecolare attuali tecniche di FISH, la cancellazione o riarrangiamento di un singolo gene può essere rilevata, traslocazioni cromosomiche criptiche possono essere visualizzate, il numero di copie di oncogeni amplificato in cellule tumorali possono essere valutate, e molto riarrangiamenti complessi possono essere characterized.Using pienamente la FISH, alterazioni genomiche possono essere studiate in quasi tutti i tipi di tessuti umani in qualsiasi fase della divisione cellulare senza la necessità di coltura cellulare e cromosoma preparation.Fluorescent in situ ibridazione può essere utilizzato per rilevare e quantificare microrganismi specifici pur mantenendo la loro integrità morfologica, senza estrazione dell'acido nucleico. Esempi cellule vengono fissate con sostanze chimiche per aumentare la loro permeabilità e consentire alla sonda di entrare nelle cellule. Fissativi dividono in due classi generali: 1) precipitanti come etanolo o metanolo e 2) agenti reticolanti come le aldeidi (ad esempio paraformaldeide). Dopo la fissazione del campione viene individuato nei pozzetti di vetrini Teflon coperto, che sono stati rivestiti di gelatina per facilitare il fissaggio del campione cells.The è essiccato e poi disidratato per immersione seriale della slitta in serie etanolo con concentrazione crescente. Dopo ibridazione con sonda in tampone di ibridazione, la sonda in eccesso viene lavato, e l'aria vetrini essiccato e quindi osservata con un microscopio a fluorescenza. ibridazione di cellule intere con fluorescenza etichettati sonde può anche essere combinato con citometria a flusso per il conteggio rapido o la raccolta di cells.FISH ibridazione in situ fluorescente India, India termine FISH Technic ExpertThe ibridazione in situ è limitato a ibridazioni di cellule intere in cui vengono rilevate le cellule in il loro microhabitat naturale. Con il metodo non si può solo determinare la morfologia delle cellule di un microorganismo uncultured e la sua abbondanza, ma anche analizzare le distribuzioni spaziali in situ. Quando combinato di microscopia confocale a scansione laser, fluorescente ibridazione in situ (FISH) può aiutare la visualizzazione di tre disposizione tridimensionale di cellule, come in biofilm o vantaggio flocs.The di ibridazione in situ è che può dare informazioni quantitative sul numero di microrganismi specifici. Tuttavia, in ibridazione in situ ha anche dei limiti. problemi incontrati spesso includono alcun segnale o bassa intensità di segnale. Ciò può essere causato da noncomplementarity della sonda e bersaglio, etichettatura sonda inefficaci o condizioni non ottimali hybrization. bassa intensità di segnale può essere causata da piccoli numeri o insufficiente accessibilità delle molecole bersaglio (rRNA). cellule dormienti o metabolicamente inattivi non possono contenere abbastanza rRNA a mostrare segnali fluorescenti dopo ibridazione. I fattori che ostacolano vincolante includono diffusione limitato di sonde rRNA mirati a causa periferie cellulari (probabilmente parete cellulare) Sonda e prevenzione causata da strutture di ordine superiore nel tipo ribosomes.The di fissativo influenza la permeabilità della parete cellulare. Anche se i batteri gram negativi di solito sono facilmente permeabilizzate con ad esempio paraformaldeide, batteri Gram-positivi possono avere bisogno di ulteriore enzimatica, il calore o il trattamento di etanolo e formalina. Con campioni ambientali complessi è difficile ottenere un buon compromesso tra la sufficienza permeabilizzazione cellulare per ibridazione efficiente e buona conservazione del dettaglio morfologico. L'accessibilità destinazione volte può essere migliorata mediante aggiunta di formammide al buffer di ibridazione. L'aggiunta di questo solvente denaturazione indebolisce gli effetti di legami idrogeno, così 'ammorbidente' ostacolo da strutture di ordine superiore. Vi è qualche indicazione che alcune regioni in rRNA potrebbero essere inaccessibili in alcuni gruppi filogenetici. A volte, spostando il sito bersaglio di pochi nucleotidi ha una grande influenza sulla sonda sensitivity.Finally, la quantificazione del numero di microrganismi con ibridazione in situ può essere problematico quando le cellule hanno forme irregolari o quando formano catene o micro-colonie compatte . In situ rilevabilità è influenzata anche da legame non specifico e autofluorescenza delle cellule e dintorni material.For ulteriori informazioni, valutazione medica e medico-mail quoteas attaccamento toEmail: - info@wecareindia.comContact Centro Tel. (+91) 9.029.304,141 mila (10 del mattino. Per 8:00. IST) (solo per i pazienti internazionali che cercano di trattamento in India)
